摘 要 隨著寵物飼養(yǎng)數(shù)量的不斷增加，寵物食品的質(zhì)量安全備受關(guān)注。霉菌毒素作為影響寵物食品質(zhì)量的重要因素之一，對寵物的健康具有潛在威脅。綜述了寵物食品中常見霉菌毒素的種類及危害，闡述了目前主要的檢測技術(shù)及其優(yōu)缺點，并對國內(nèi)外寵物食品中霉菌毒素的污染及監(jiān)管現(xiàn)狀進行了總結(jié)。
關(guān)鍵詞寵物食品；霉菌毒素；檢測技術(shù)；污染現(xiàn)狀；監(jiān)管體系
近年來，寵物市場快速發(fā)展，寵物食品的安全性成為人們關(guān)注的焦點。霉菌毒素污染是寵物食品行業(yè)面臨的重要問題之一，不僅影響寵物的健康，也關(guān)系到寵物食品行業(yè)的可持續(xù)發(fā)展。了解寵物食品中霉菌毒素的監(jiān)測方法與污染現(xiàn)狀對保障寵物健康具有重要意義。
1 寵物食品中主要的霉菌毒素種類及危害
以犬、貓飼糧為主的寵物食品主要有干糧（水分含量5%~12%）、半濕糧（水分含量22%~35%）和濕糧（水分含量>65%）3種形式，其中，寵物干糧由于便于儲存和喂養(yǎng)，在寵物食品行業(yè)中占據(jù)較大份額。寵物干糧是一種營養(yǎng)均衡的飼料，主要組成包括玉米、小麥、大米等谷物產(chǎn)品和雞肉、魚肉等動物蛋白。因此，與谷物產(chǎn)品類似，寵物食品中較常出現(xiàn)的霉菌毒素包括黃曲霉毒素（Aflatoxin， AF）、脫氧雪腐鐮刀菌烯醇（Deoxynivalenol， DON）、伏馬毒素（Fumonisin， FB）、赭曲霉毒素A（Ochratoxin A， OTA）和玉米赤霉烯酮（Zearalenone， ZEA）。
多數(shù)有關(guān)霉菌毒素含量污染的調(diào)查都是基于寵物干糧樣品進行的。與肉用動物相比，寵物具有獨特的伴侶特性，因此，寵物食品的安全性以及寵物食品中污染物對寵物健康的潛在危害也更引人關(guān)注。AFs是由黃曲霉或寄生曲霉產(chǎn)生的次級代謝產(chǎn)物，在寵物食品中已檢測到4種天然AFs，包括AFB1，AFB2，AFG1和AFG2，其中AFB1致病性最強，AFs常見于玉米、花生、棉籽、牛奶和堅果中。當犬攝入被AFs污染的飼糧時，霉菌毒素被十二指腸吸收，進入血液與血漿白蛋白結(jié)合，通過血流運輸進入肝臟。AFB1在肝臟中可轉(zhuǎn)化為有毒的環(huán)氧化物，與DNA、RNA和蛋白酶發(fā)生反應，導致肝功能異常、肝臟腫大等，甚至引發(fā)肝癌。
DON主要由禾谷鐮刀菌產(chǎn)生，是常見于谷物和動物產(chǎn)品中的B型單端孢霉烯族化合物，也稱為“嘔吐毒素”。DON理化性質(zhì)穩(wěn)定，在寵物食品加工過程中較難消除。DON暴露可能會導致不良影響，包括體增重減少、神經(jīng)內(nèi)分泌變化以及通過干擾蛋白質(zhì)合成影響寵物的免疫系統(tǒng)等。研究表明，巨噬細胞、T細胞和B細胞等免疫細胞對DON暴露敏感，DON的劑量和暴露時間不同，可能對機體的免疫功能產(chǎn)生刺激或抑制作用，一般來說，低劑量DON可以誘發(fā)炎癥反應，高劑量DON可以誘發(fā)免疫抑制，長期DON暴露具有免疫抑制作用。
OTA由曲霉屬和青霉屬產(chǎn)生，主要存在于谷物和動物副產(chǎn)品中，OTA與血漿蛋白緊密結(jié)合，在動物組織中半衰期較長。OTA的同系物有OTB、OTC和OTD，其中OTA的毒性最強且分布最廣。OTA的主要靶器官是腎臟，其與血清中的蛋白質(zhì)緊密結(jié)合并在腎臟中積累，可擾亂腎小管細胞中蛋白質(zhì)的合成等生物過程并引起腎小管間質(zhì)纖維化，產(chǎn)生腎毒性。犬對OTA較敏感，OTA中毒的臨床癥狀包括厭食、體重減輕、嘔吐、血性腹瀉和脫水等。
ZEA是一種非甾體雌激素毒素，主要由幾種鐮刀菌屬產(chǎn)生，其結(jié)構(gòu)與雌激素類似，在體內(nèi)可通過與胞質(zhì)雌激素受體結(jié)合發(fā)揮雌激素作用。雄性和雌性犬都會受到ZEA毒性的影響。雌性寵物暴露于ZEA后，輸卵管和子宮會出現(xiàn)增生和積水，雄性寵物暴露于ZEA會導致精子生成量減少。寵物食品中約1 mg/kg的ZEA可能導致不孕，影響排卵、受孕、著床、胎兒生長和新生兒的生存能力。
FBs由鐮刀菌產(chǎn)生，目前已鑒定出超過15種形式，其中FB1，F(xiàn)B2和FB3較常見，F(xiàn)B1在食品中占FBs總含量的70%∼80%。肝臟和腎臟被證明是FBs急性暴露的主要靶器官，而FBs慢性暴露則影響免疫系統(tǒng)。FBs可能通過破壞鞘脂代謝，進而導致細胞損傷、凋亡、壞死和代償性增生。
2 寵物食品中霉菌毒素的檢測方法
目前，有多種寵物食品中霉菌毒素的檢測方法，其中高效液相色譜法（High performance liquid chromatography， HPLC）和液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法（Liquid chromatography tandem mass spectrometry， LC-MS/MS）具有高靈敏度和高選擇性，能夠同時準確檢測多種霉菌毒素的含量。
Castaldo等開發(fā)了超高效液相色譜-高分辨質(zhì)譜法（Ultra-high performance liquid chromatography-Q-orbitrap high resolution mass spectrometry， UHPLC-Q-Orbitrap HRMS），可以同時測定寵物食品中28種霉菌毒素。酶聯(lián)免疫吸附測定法（Enzyme-linked immunosorbent assay， ELISA）具有操作簡便、快速的優(yōu)點，適合大量樣品的初步篩查。因此，許多調(diào)查寵物食品中霉菌毒素發(fā)生情況的研究是基于ELISA試劑盒測定其中的霉菌毒素污染水平，然而，多數(shù)霉菌毒素檢測試劑盒只能實現(xiàn)單一種類霉菌毒素的測定。
此外，薄層色譜法靈敏度相對較低，逐漸被其他檢測方法替代。近年來，一些研究者建立了基于核酸適配體和生物傳感器的霉菌毒素檢測方法，但尚未形成標準檢測體系，在實際推廣應用中受到限制。在實際檢測中，常根據(jù)檢測需求和條件選擇合適的方法，或者多種方法聯(lián)合使用以確保檢測結(jié)果的準確性。
在調(diào)查犬干糧樣品時，一項研究使用ELISA方法廣泛篩查樣本中霉菌毒素，同時采用基于免疫親和凈化的HPLC方法進行確證分析。表1總結(jié)了《寵物飼料衛(wèi)生規(guī)定》中推薦的寵物食品中霉菌毒素的檢測方法，標準的霉菌毒素檢測方法以液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法為主。
表1 《寵物飼料衛(wèi)生規(guī)定》中推薦的寵物食品中霉菌毒素的檢測方法Table 1 Methods for the detection of mycotoxins in pet food recommended in the Pet Feed Hygiene Regulations
3 寵物食品中霉菌毒素的污染狀況
在世界范圍內(nèi)，多項研究報道了寵物食品中霉菌毒素的調(diào)查結(jié)果。與貓糧相比，犬糧中谷物含量更高，霉菌毒素污染的可能性更大。一項南非的研究分別檢測了犬糧和貓糧中幾種主要霉菌毒素的水平，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，貓糧樣本中AFB1的平均檢出水平比犬糧樣本高，優(yōu)質(zhì)品牌貓糧中AFB1的平均檢出水平為125.02 μg/kg。基于64份貓糧樣品的調(diào)查結(jié)果顯示，DON和FB在貓糧樣品中的污染率較高，檢出率分別為80%和96%，說明貓糧中霉菌毒素的污染同樣需要重點關(guān)注。在奧地利市場收集的76份犬干糧中，檢出率最高的霉菌毒素是DON（83%），其次是ZEA（47%）和FBs（42%）。
波蘭研究人員在49份寵物干糧（犬糧25份，貓糧24份）中全部檢測到DON和ZEA污染，超過80%的樣品被T-2毒素或HT-2毒素污染，該研究說明多種寵物食品中多種霉菌毒素同步污染的現(xiàn)象突出。同樣，在64份貓糧樣品中霉菌毒素共存的發(fā)生率為78%。基于100份犬糧的調(diào)查結(jié)果顯示，50%的樣品同時受到AFs，ZEA和FBs的共同污染，尤其是ZEA與FBs的共同污染。有研究報道了我國寵物食品中霉菌毒素的污染狀況。2017年，安琪酵母股份有限公司檢測了10份犬糧樣品中AFB1，ZEA和DON的污染狀況，其中ZEA和DON的檢出率為100%，AFB1的檢出率為90%。在2018年調(diào)查的寵物糧中，ZEA與DON的檢出率為100%，AFB1的檢出率為66.7%，ZEA，DON和AFB1在寵物糧樣品中的平均檢測水平分別為107.19 μg/kg，309.78 μg/kg和0.55 μg/kg。
2020年廣東省54份寵物食品的調(diào)查結(jié)果顯示，樣本中AFB1，ZEA，DON和FB1的檢出率均約50%，其中AFB1污染情況極其嚴重，最高檢出水平達242.7 μg/kg，幾乎全部樣本中AFB1水平超過了《寵物飼料衛(wèi)生規(guī)定》的限量水平，ZEA的最高污染水平也超過了《寵物飼料衛(wèi)生規(guī)定》的限量水平。收集了32份犬干糧樣品，通過LC-MS/MS法測定其中的AFB1，AFG1，ZEA，DON，T-2，白僵菌素（BEA），柑橘毒素（CIT），OTA，F(xiàn)B1含量，結(jié)果表明，96.9%的樣品受到至少3種不同類型霉菌毒素的污染，AFB1與BEA的檢出率>90%，AFB1的檢出水平在30.3~242.7 μg/kg，全部超過《寵物飼料衛(wèi)生規(guī)定》的限量水平。對我國市場進口品牌貓糧和犬糧中霉菌毒素測定分析的結(jié)果顯示，超過90%的樣本受到2種及以上霉菌毒素污染，且與寵物罐頭食品相比，寵物干糧霉菌毒素污染水平更高。
4 我國寵物食品中霉菌毒素監(jiān)管現(xiàn)狀
依據(jù)《飼料和飼料添加劑管理條例》（國務(wù)院令第609號），我國對寵物食品制定了系列規(guī)范性文件，包括《寵物飼料管理辦法》《寵物飼料生產(chǎn)企業(yè)許可條件》《寵物飼料標簽規(guī)定》《寵物飼料衛(wèi)生規(guī)定》《寵物配合飼料生產(chǎn)許可申報材料要求》等規(guī)范性文件（農(nóng)業(yè)農(nóng)村部公告第20號）?！秾櫸镲暳闲l(wèi)生規(guī)定》自2018年6月起施行，與《飼料衛(wèi)生標準》（GB 13078—2017）類似，《寵物飼料衛(wèi)生規(guī)定》中同樣限定了6類霉菌毒素的限量水平，比畜禽飼料霉菌毒素的限量水平更嚴格，但與食品中霉菌毒素的限量水平相比，寵物食品中限量要求較寬松（寵物食品中赭曲霉毒素A的限量水平更嚴格，表2）。
對于寵物食品中霉菌毒素的日常監(jiān)管，自2016年起，我國農(nóng)業(yè)農(nóng)村部對寵物食品開展產(chǎn)品質(zhì)量安全風險監(jiān)測，從監(jiān)管角度考慮，寵物食品歸屬于飼料類別，因此，農(nóng)業(yè)農(nóng)村部畜牧獸醫(yī)局每年制定飼料安全質(zhì)量監(jiān)管工作方案及任務(wù)，其中包含寵物食品。
在監(jiān)測過程中，將寵物食品分為寵物配合飼料、寵物預混合飼料和寵物零食，對抽取到的寵物配合飼料和寵物零食樣品進行霉菌毒素含量測定，并公開監(jiān)測結(jié)果。
目前，市場上部分企業(yè)對霉菌毒素的危害認識不足，缺乏有效的質(zhì)量控制措施，且隨著跨境電商等新興銷售渠道的出現(xiàn)，給監(jiān)管帶來了新的挑戰(zhàn)。基于這些挑戰(zhàn)，需進一步完善監(jiān)管法規(guī)和標準，加強對寵物食品生產(chǎn)、銷售等環(huán)節(jié)的監(jiān)管力度，同時建立健全質(zhì)量追溯體系，確保問題產(chǎn)品能夠及時召回，此外，可以加強國際合作與交流，借鑒國外先進的監(jiān)管經(jīng)驗和檢測技術(shù)。
表2 寵物食品、飼料和食品中霉菌毒素限量水平Table 2 Mycotoxin limit levels in pet food， feed and food
5 總結(jié)
寵物食品成分復雜，基質(zhì)干擾嚴重，需研發(fā)快速、準確、靈敏的多種霉菌毒素同步檢測方法，提高檢測的自動化水平，降低檢測成本，加強生物傳感器等新型檢測技術(shù)的研究和應用，實現(xiàn)現(xiàn)場實時檢測。加強寵物食品的監(jiān)管是降低霉菌毒素對寵物健康危害的主要手段之一。此外，《寵物飼料衛(wèi)生規(guī)定》中霉菌毒素的限量水平不是以犬、貓為靶動物進行的毒性研究得出，需制定更精細準確的限量標準，促進寵物行業(yè)的高質(zhì)量和持續(xù)發(fā)展。
來源：動物經(jīng)濟學報
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